En las últimas dos décadas, la microscopía ha visto avances sin precedentes en velocidad y resolución. Sin embargo, las estructuras celulares son esencialmente tridimensionales y las técnicas convencionales de súper resolución a menudo carecen de la resolución necesaria en las tres direcciones para capturar detalles a escala nanométrica. Un equipo de investigación dirigido por la Universidad de Göttingen, que incluye a la Universidad de Würzburg y el Centro de Investigación del Cáncer de los EE. UU., investigó una técnica de imágenes de superresolución que implica combinar las ventajas de dos métodos diferentes para lograr la misma resolución en las tres dimensiones; esta es una resolución «isotrópica». Los resultados fueron publicados en Avances de la ciencia.
A pesar de las tremendas mejoras en la microscopía, todavía existe una brecha notable entre la resolución en las tres dimensiones. Uno de los métodos que pueden cerrar esta brecha y lograr una resolución en el rango de nanómetros son las imágenes de transferencia de energía inducida por metales (MIET). La excepcional resolución de profundidad de las imágenes MIET se combinó con la extraordinaria resolución lateral de la microscopía de localización de una sola molécula, en particular con un método llamado microscopía de reconstrucción óptica estocástica directa (dSTORM). La novedosa técnica basada en esta combinación permite a los investigadores obtener imágenes isotrópicas tridimensionales de superresolución de estructuras subcelulares. Además, los investigadores implementaron MIET-dSTORM de dos colores, lo que les permitió obtener imágenes de dos estructuras celulares diferentes en tres dimensiones, por ejemplo, microtúbulos y fosas recubiertas de clatrina (pequeñas estructuras dentro de las células) que existen juntas en la misma área.
«Al combinar los conceptos establecidos, desarrollamos una nueva técnica para la microscopía de súper resolución. Su principal ventaja es que permite una resolución extremadamente alta en tres dimensiones, a pesar de usar una configuración relativamente simple», dice el Dr. Jan Christoph Thiele, primer autor de la publicación. , Universidad de Gotinga. «Esta será una herramienta poderosa con numerosas aplicaciones para resolver complejos de proteínas y orgánulos pequeños con precisión subnanométrica. Todos los que tengan acceso a la tecnología de microscopio confocal con un escáner láser rápido y capacidades de medición de vida útil de fluorescencia deberían probar esta técnica», dice el Dr. Oleksii Nevskyi, uno de los autores correspondientes.
«La belleza de la técnica es su simplicidad. Esto significa que los investigadores de todo el mundo podrán implementar la tecnología en sus microscopios rápidamente», agrega el profesor Jörg Enderlein, quien dirigió el equipo de investigación en el Instituto de Biofísica de la Universidad de Göttingen. Este método promete convertirse en una poderosa herramienta para la microscopía de superresolución 3D multiplexada con una extraordinaria alta resolución y una variedad de aplicaciones en biología estructural.
Fuente de la historia:
Materiales proporcionado por Universidad de Gotinga. Nota: el contenido se puede editar por estilo y longitud.
